“四一二”事變的發(fā)生,，和南京國民政府的建立，使在國民革命軍占領(lǐng)下的廣東,、福建、廣西,、安徽,、浙江、江蘇,，以及公開歸附國民黨的西南諸省,，先后都站到了蔣介石南京國民黨的一邊，江西朱培德則夾在寧漢中間,，兩邊搖擺,。共產(chǎn)黨及其影響下的左翼國民黨人，實(shí)際上有效控制的區(qū)域,，只剩下了湖北和湖南兩省區(qū),。兩省原本就因工農(nóng)運(yùn)動造成經(jīng)濟(jì)危機(jī)，外交關(guān)系緊張,，如今航運(yùn)及陸路均遭封鎖,，財(cái)政更加困難,，統(tǒng)戰(zhàn)關(guān)系，乃至軍隊(duì)和工農(nóng)運(yùn)動之間的關(guān)系,，也愈發(fā)緊張起來,。湖北夏斗寅部和湖南長沙許克祥部相繼發(fā)動的武裝叛亂，更進(jìn)一步使武漢政府失去了對湖北部分地區(qū),，特別是湖南大部分地區(qū)控制,，從而更加突顯了武漢國民黨地位的岌岌可危。再加上北京政府這時突然襲擊了蘇聯(lián)大使館,，不僅捕殺了包括李大釗在內(nèi)的一批共產(chǎn)黨員和國民黨員,，而且查抄和很快公布了大批暴露出蘇聯(lián)大力援助國民黨和馮玉祥國民軍的秘密文件。此舉對國民黨人和馮玉祥都造成了很大的政治壓力,。武漢政府甚至解除了鮑羅廷的顧問職務(wù),。

面對如此嚴(yán)重的局面，在武漢的鮑羅廷和中共中央主要領(lǐng)導(dǎo)人,，均不得不力謀妥協(xié),，以求緩和危險(xiǎn)局勢。然而,，斯大林等卻因?yàn)辄h內(nèi)斗爭的需要,，為否認(rèn)托洛茨基等關(guān)于其中國政策是嚴(yán)重階級妥協(xié)路線的指責(zé)，堅(jiān)持要求中共采取更加激烈的徹底的革命方針,。其隨后發(fā)出的著名的“五月指示”,，固然在形式上也肯定“必須同過火行為作斗爭”，“不要觸及軍官和士兵的土地”,，要對手工業(yè)者,、商人和小地主做出讓步，但是,，它同時強(qiáng)硬要求:（1）堅(jiān)決主張從下面實(shí)際占領(lǐng)土地,，對此必須千方百計(jì)地加以促進(jìn)。（2）從下層吸收新的工農(nóng)領(lǐng)導(dǎo)人加入國民黨中央,，改變國民黨目前的構(gòu)成,。（3）動員兩萬共產(chǎn)黨員和兩湖地區(qū)五萬革命工農(nóng)，組建自己的軍隊(duì),。（4）成立以著名國民黨人和非共產(chǎn)黨人為首的革命軍事法庭,，懲辦反動軍官。[轉(zhuǎn)見《聯(lián)共（布）中央政治局會議第107號（特字第85號）記錄》,，1927年6月2日，《聯(lián)共（布）,、共產(chǎn)國際與中國國民革命運(yùn)動（1926－1927）》（下）,，第298－299頁,。]

莫斯科“五月指示”中的要求，或者因?yàn)闊o法向國民黨中央提出,，或者因?yàn)樵谌绱诵蝿菹露虝r期不可能實(shí)行,，因而在實(shí)際上被中共中央束之高閣。但是,，來自莫斯科的共產(chǎn)國際代表團(tuán)團(tuán)長羅易,，卻不甘于此，私下里擅自把莫斯科的來電拿去給武漢國民黨領(lǐng)袖汪精衛(wèi)看,，希望能夠取得汪精衛(wèi)的諒解,，然后漸次推行。作為一種討價還價,，汪精衛(wèi)提出了1500萬元的貸款要求,。而莫斯科研究再三，一時也只能同意提供200萬盧布的援助,。[《斯大林給莫洛托夫的信》,，1927年6月24日；《聯(lián)共（布）中央政治局會議第113號（特字第91號）記錄》,，1927年6月27日,，《聯(lián)共（布）、共產(chǎn)國際與中國國民革命運(yùn)動》（下）,，第352,，364頁。]

1927年6月22日,，武漢國民黨人唯一還可以寄予期望的馮玉祥,，公開轉(zhuǎn)向了蔣介石南京國民黨人一邊，要求武漢國民黨遣送鮑羅廷回國,，并與共產(chǎn)黨實(shí)行分離的政策,。緊接著，湖南籍將領(lǐng)唐生智,、何健等公開站到同情許克祥等人的一邊,，指責(zé)工農(nóng)運(yùn)動，并對武漢國民黨中央繼續(xù)容納共產(chǎn)黨人表示不滿,。7月8日,，共產(chǎn)國際執(zhí)委會在發(fā)現(xiàn)形勢已不可逆轉(zhuǎn)之后，明令共產(chǎn)黨員不能再留在國民政府里面,，必須退出政府以示抗議,，并準(zhǔn)備在排除國民黨中央的情況下，自行召集國民黨新一屆代表大會,，以根本奪取對國民黨的領(lǐng)導(dǎo)權(quán),。時至于此,，汪精衛(wèi)不得不把莫斯科的“五月指示”在黨內(nèi)高層公開出來。其結(jié)果可想而知,，7月15日,，武漢國民黨中央最終確定了分共的方針。國共兩黨黨內(nèi)合作的歷史,，就此畫上了句號,。